岛津 HPLC操作要点，核心就是：稳开机、严过滤、慢平衡、规范进样、冲干净关机、勤维护。下面用大白话讲全流程要点和禁忌，好记、好操作。
环境与电源
室温 15–30℃、湿度＜60%，远离震动、阳光直射；电源接地要好，防止干扰与触电。
流动相
必须用 色谱纯 试剂 + 超纯水
配好后 0.45μm 或 0.22μm 滤膜过滤，超声脱气 10–20 分钟
缓冲盐要现配现用，pH 要准；严禁未过滤直接上机
色谱柱
确认型号、柱压上限（一般 C18＜20 MPa）；新柱先看说明书活化
仪器检查
管路不漏液、溶剂瓶够量、废液桶清空、进样针 / 阀干净
开泵、检测器、柱温箱、工作站，等待自检
泵排气（Purge）
打开泵排气阀，按 Purge 键（默认约 3–5 min，大流速冲）
看到管路无气泡再关阀；有气泡必重排，否则压力乱、基线跳
设参数：流速（常用 1.0 mL/min）、柱温（30–40℃）、波长、运行时间
系统平衡
用流动相冲至 基线平稳、压力稳定（通常 30–60 min）
含盐流动相平衡更慢；没平衡好别进样
手动进样（常用）
样品必须 0.22μm 过滤，无浑浊、无颗粒
进样针先用样品润洗 ≥5 次，排净气泡
阀打到 Load 上样 → 平稳切到 Inject 同时开始采集
进样量不超定量环的 50–70%（如 20μL 环≤10–15μL）
自动进样器
样品瓶液面够、瓶盖拧紧、无气泡
设定进样体积、洗针程序（每样后洗针）
样品盘轻推到位，听到 “咔嗒" 再运行
压力监控（最关键）
正常压力波动＜±5%；突然升高 30%→立即停泵
堵因：滤膜脏、柱头堵、管路折扁、盐结晶
压力骤降：漏液、溶剂空、单向阀坏
基线与峰形
漂移大：未平衡、温度变、氘灯弱、流动相污染
峰拖尾 / 前伸：柱脏、pH 不对、过载、进样污染
严禁
流速猛升猛降（要逐步调）
柱温忽高忽低
运行中拆柱、拧接头（必须先停泵、泄压）
用纯水 / 10% 甲醇冲盐（最容易忘）
流动相含缓冲盐：
先用 10% 甲醇 / 水 0.5–1.0 mL/min 冲 45–60 min → 再纯甲醇冲 30 min
只用有机溶剂：直接甲醇 / 乙腈冲 30 min
色谱柱保存
反相 C18：纯甲醇或乙腈封存，两头堵头
正相柱：正己烷封存
长期不用：定期拿出来冲一遍
每周
更换 / 清洗流动相吸滤头（堵了最易压力高）
擦进样阀、洗针、擦检测器流通池窗口
每月
检查泵密封垫（漏液就换）
检查氘灯使用时间（寿命约 2000 小时，能量低就换）
每季度
测柱效（理论塔板数），判断柱子要不要再生或更换
流动相不过滤、不脱气 → 堵柱、基线乱、压力不稳
用含盐后不冲盐 → 盐结晶毁泵、毁柱、毁阀（最伤仪器）
进样不过滤 / 样品脏 → 柱头污染、峰形差、柱压飙升
流速 / 温度突变 → 保留时间飘、柱寿命短
关机不冲柱直接关 → 下次开机必出问题
简单记：过滤脱气、充分平衡、缓慢升降、含盐必冲、干净关机。做到这几点，岛津 HPLC 基本稳定、少坏、数据准。
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